經過30多年的快速發展,抗體的生產已成為當今世界的主流生物制藥行業最賺錢的領域??贵w的糖型對維持抗體結構和治療效果至關重要。
附著在蛋白質上的多糖可分為三種類型:N-聯、O-聯和糖胺聚糖。幾乎所有單克隆抗體都有 Asn-XXX-Ser/Thr (XXX≠Pro)序列,這是 CH2 結構域重鏈 Asn297 殘基的 N-糖基化序列。一些單克隆抗體在絲氨酸和蘇氨酸殘基上具有 O 型連接聚糖,主要發生在鉸鏈區。N-糖基化可以影響 Fc 構象,從而影響抗體與受體的結合親和力。
Fc(片段可結晶)效應功能包括抗體依賴的細胞毒性(ADCC)、補體依賴的細胞毒性(CDC)和抗體依賴的細胞吞噬作用。這些功能是由抗原-抗體復合物的形成觸發的,這些復合物隨后被 Fcγ 受體(Fcγ rs)識別。多糖作為生物的基本組成部分之一,在細胞的分子識別、粘附和信號傳遞中起著重要的作用。
適當的糖基化對藥代動力學至關重要。Fc 效應功能與抗體安全性;因此,檢測聚糖對控制抗體質量至關重要。因此,探索評價多糖性質的分析方法在實驗室和工業中具有重要的意義。
由于糖結構的復雜性,抗體藥物實際上是不同糖型蛋白質的混合物。為了生產均相產物,已經開發了實現特定 N-糖基化類型的方法。
考慮到 N-糖基化對血清中抗體半衰期及其生物活性的重大影響,迫切需要開發可靠的 N-糖基化分析方法。有幾種方法可以用來識別附著在抗體 Fc 區上的 N-聚糖??贵w的糖聚糖修飾可以通過三個不同的階段確定:在完整的糖蛋白水平,在糖肽階段,或通過分析釋放的糖聚糖。
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